编者按：促红细胞生成素(EPO）是一种糖蛋白激素，在体内可抑制骨髓中红系祖细胞的调亡并诱导其分化成熟为红细胞。近年来，随着EPO及其受体(EPOR)在视网膜中研究的不断深入，众多学者发现其不仅对维持视网膜正常生理功能有重要作用，而且在临床个案研究中，玻璃体腔内注射EPO可提高难治性、弥漫性糖尿病黄斑水肿患者的视力、并显著减轻黄斑水肿。由于血-视网膜屏障的破坏是促使糖尿病性黄斑水肿发生发展的主要因素，这提示EPO可能是通过改善糖尿病患者血-视网膜屏障的功能以实现减轻黄斑水肿的效果。Retina China2021会议上，上海交通大学附属第一人民医院的张敬法教授采用糖尿病大鼠模型，探索了EPO保护糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障功能中可能的分子机制。
该研究通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，并行眼内注射EPO治疗，利用FITC-dextran渗漏实验检测视网膜切片(图1)及铺片(图2）中dextran的渗漏情况。
研究结果显示：
1.与正常对照组相比，糖尿病大鼠视网膜FITC-dextran的渗漏较正常组及EPO治疗组明显增加，且主要分布在外层视网膜及微血管周围。
2.剥离大鼠RPE-Bruch膜-脉络膜毛细血管复合体(RBCC)进行组织学及分子生物学检测后发现，糖尿病组紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白分布紊乱，表达显著降低。而EPO治疗能有效预防或逆转上述的改变，提示：EPO玻璃体腔注射对糖尿病大鼠血-视网膜外屏障具有保护作用。
3.在体外细胞模型中，发现上述保护机制是通过抑制糖尿病状态下RPE细胞中过度激活的HIF-1α和JNK通路实现的。
4.在糖尿病大鼠视网膜中，VE-cadherin总蛋白的表达随病程进展逐渐下降，而磷酸化VE-cadherin及其上游Src激酶的磷酸化水平在发病早期表达升高，而晚期降低。为了探究产生该现象的原因，张教授研究团队采用乙二醛处理HRMECs、HUVEC建立体外细胞模型，细胞膜浆分离结果显示：EPO可抑制乙二醛刺激的内皮细胞中VE-cadherin的内化。
此外，雷珠单抗和Src抑制剂均可减少乙二醛刺激后内皮细胞中Src和VE-cadherin的磷酸化，从而维持VE-cadherin蛋白的整体水平；EPO对该信号通路的抑制作用也在动物实验中得到了验证。由此推测，EPO可通过抑制VEGF/VEGFR2/Src信号通路，降低血管内皮细胞中VE-cadherin的磷酸化和内化保护血-视网膜内屏障。
小结
在糖尿病大鼠的动物模型中，血-视网膜内、外屏障均发生破坏。EPO可通过抑制HIF-1α和JNK通路，上调RPE细胞中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达保护外屏障；并通过抑制VEGF/VEGFR2/Src信号通路，降低微血管内皮细胞中VE-cadherin的磷酸化和内化保护内屏障功能。
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Linda Gareth
2015年3月6日, 下午2:51Donec ipsum diam, pretium maecenas mollis dapibus risus. Nullam tindun pulvinar at interdum eget, suscipit eget felis. Pellentesque est faucibus tincidunt risus id interdum primis orci cubilla gravida.