ARVO中国之声|基于iPSCs衍生的血管网络和视网膜色素上皮的外血-视网膜屏障新模型

  • 2023-05-08 15:29:00
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编者按:外血-视网膜屏障(oBRB)在维持视网膜的稳态方面发挥着重要作用,但是目前oBRB功能障碍的病理机制尚不清楚,缺乏分析oBRB调节的适当模型。在ARVO2023会上,爱尔眼科研究所唐仕波教授团队的Jianing Gu分享了团队建立的一个源自人类诱导多能干细胞(iPSC)的新型oBRB模型的相关信息,此模型用于研究oBRB不同成分的协同作用。

oBRB模型的建立

研究者首先通过iPSC建立了自组织的3D人类血管类器官,然后将其与I型胶原混合,形成模拟脉络膜微血管层的毛细血管网络。而后衍生自iPSC的视网膜色素上皮(RPE)在胶原构建体的表面上共同培养,建立oBRB。两周后,研究者通过免疫荧光(IF)检测构建oBRB系统的形态,并使用RNA测序分析鉴定差异表达的基因。

oBRB不同成分间的相互作用

研究者成功通过iPSC衍生的RPE和iPSC衍生血管网络建立了oBRB系统模型(图1A)。培养一周后,形成融合的RPE细胞单层和脉络膜样血管结构(图1B)。RPE细胞融合为单层和多边形,血管网顶部具有精细致密和明显的六边形特征(图1C)。冷冻切片表明,oBRB模型概括了体内oBRB复合物的重要生理内容。RPE单层显示RPE特异性标记物酪氨酸酶和ZO-1(图1D-F)。RPE单层下的血管网络层对血管内皮细胞CD31呈阳性反应(图1E-F)。IV型胶原(COL IV)和层粘连蛋白(LAM)的Bruch's膜蛋白表达向RPE单层极化,表明RPE细胞的旁分泌信号传导在Bruch's膜的形成中发挥作用。

图1

oBRB模型的建立意义

研究者通过构建的接触式共培养oBRB系统模型探讨了RPE细胞与血管网络之间的细胞相互作用,有利于了解oBRB的生理结构、病理变化,利于进一步治疗BRB功能障碍。

讲题:A novel model of the out blood-retinal barrier based on iPSCs-derived vessel network and retinal pigment epithelium.

作者:Jianing Gu, Yini Wang, Chengcheng Ding, Jiansu Chen, Shibo Tang

2 comments

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条评论

  • Linda Gareth
    2015年3月6日, 下午2:51

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